酵母双杂交体系实验原理（酵母双杂交体系）

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酵母双杂交体系(yeast two hybrid system)这是一种直接在细胞内外检测蛋白质交互作用的方法。转录因子一般由相对独立的DNA结合结构城(DNA binding domain,DBD) 和转录激活结构城(activation domain,AD) 组成。将蛋白x 的基因与DBD的基因融合形成一一个杂交体(DBD-X),将蛋白Y 的基因与AD的基因融合形成另一个杂交体(AD -Y)。当这两个杂交体在同一细胞中表达时，由于蛋白X与蛋白Y 能相互结合，使DBD 与AD 结合在一起，形成一个完整而有活性的转录因子，从而激活报告基因的转录。在细胞中，单独DBD 杂交体或AD 杂交体都不导致报告基因转录。通过检测报告基因是否被转录而研究蛋白X、Y 之间的相互作用。如果将Y 改成基因文库，那么即可直接从基因库中筛选到能与蛋白X 相互作用蛋白的DNA 序列。

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